ABSTRACT
@#[摘 要] 目的：探究miR-32-5p通过靶向zeste基因增强子人类同源物2（EZH2）对胰腺癌PANC-1细胞恶性生物学行为的影响及其分子机制。方法：利用GEPIA数据库分析胰腺癌组织中EZH2的表达水平及其与患者的预后生存期的关系，并分析miR-32-5p表达与患者临床病理因素的关系。qPCR法检测正常胰腺HPDE6-C7细胞和胰腺癌PANC-1、AsPC-1、SW1990细胞中miR-32-5p和EZH2 mRNA的表达，通过LipofectamineTM 2000将miR-NC、miR-32-5p mimic、miR-32-5p inhibitor、pcDNA-NC、pcDNA EZH2质粒分别转染PANC-1细胞，其分为对照组（不转染）、 miR-NC组（转染miR-NC）、 miR-32-5p mimic组（转染miR-32-5p mimic）、Anti-miR-32-5p组（转染miR-32-5p inhibitor）、miR-NC+pcDNA-NC组（转染miR-NC+pcDNA-NC）、miR-NC+pcDNA EZH2组（转染miR-NC+pcDNA EZH2）、miR-32-5p mimic+pcDNA-NC组（转染miR-32-5p mimic+pcDNA-NC）、miR-32-5p mimic+pcDNA EZH2组（转染miR-32-5p mimic+pcDNA EZH2）。双荧光素酶报告基因实验验证miR-32-5p与EZH2的靶向关系；MTT法及克隆形成实验检测各组细胞的增殖能力，划痕愈合实验检测各组细胞的迁移能力；Transwell小室实验检测各组细胞的侵袭能力，WB法检测各组细胞EZH2、E-cadherin、N-cadherin的表达；裸鼠成瘤实验检测转染后各组PANC-1细胞移植瘤的生长情况，免疫组化染色法观察移植瘤组织中Ki67和MMP-2的表达。结果：GEPIA数据库显示胰腺癌组织中EZH2的表达水平高于癌旁组织，患者预后生存期与EZH2的表达水平呈负相关（均P<0.05）；miR-32-5p表达水平与胰腺癌神经浸润、肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移有明显的关联（均P<0.05）；与HPDE6-C7细胞相比，PANC-1、AsPC-1、SW1990细胞中miR-32-5p呈高表达、EZH2 mRNA呈低表达、miR-32-5p表达水平与EZH2表达水平呈负相关（均P<0.05）。miR-32-5p靶向EZH2且抑制其表达（均P<0.05）；过表达miR-32-5p能够下调Ki67、MMP-2、N-cadherin表达水平、上调E-cadherin表达水平，抑制PANC-1细胞的增殖、迁移和侵袭能力，抑制移植瘤质量增加（均P<0.05）。结论：miR-32-5p能够靶向调控EZH2从而影响胰腺癌PANC-1细胞的增殖、迁移、侵袭、EMT进程及裸鼠体内移植瘤的生长。